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本教程包括显微镜的使用，主要细胞器的观察，细胞培养方面的技术和方法及细胞遗传方面的经典实验等方面内容，力求用图解方法将实验过程的每一步骤详细展示，使操作过程可视化，清晰，简洁，便于学生按图索骥。内容涉及30个细胞生物学的基础实验和综合实验，其中，基础性实验能够满足不同的学校教学学时的实际教学需要；提高性的综合性实验可以帮助同学进行创新课题的研究。

本书对实验的设计对本科生乃至研究生的实验操作以及技能培养都有参考意义。

显微仪器篇1

【实验一】光学显微镜的使用及生物绘图法练习1

【实验二】荧光显微镜的操作和使用9

【实验三】体视荧光显微镜使用操作19

【实验四】共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）的使用25

基础实验篇38

【实验五】细胞大小和数目的测量及计算38

【实验六】细胞膜的渗透性45

【实验七】去污剂对红细胞膜稳定性的影响49

【实验八】植物凝集素对红细胞的凝集反应52

【实验九】线粒体和液泡系的超活染色与观察54

【实验十】叶绿体的分离与荧光观察59

【实验十一】线粒体和细胞核的制备与观察63

【实验十二】酸性磷酸酶的显示方法67

【实验十三】植物细胞骨架的光学显微镜观察71

【实验十四】植物细胞胞间连丝的光学显微镜观察74

【实验十五】DNA的孚尔根（Feulgen）核反应染色法75

【实验十六】放线菌素D诱导细胞凋亡的形态学观察78

细胞培养篇82

【实验十七】烟草叶片愈伤组织的诱导和培养82

【实验十八】烟草BY2细胞的同步化培养85

【实验十九】烟草叶肉原生质体的分离、融合与培养92

【实验二十】鸡胚细胞的原代培养96

【实验二十一】HeLa细胞的传代培养101

【实验二十二】小鼠颅盖骨成骨细胞的原代培养104

【实验二十三】动物细胞的冻存和复苏109

【实验二十四】动物细胞融合实验113

技能提高篇116

【实验二十五】拟南芥绿色荧光蛋白标记基因的遗传转化116

【实验二十六】去壁低渗火焰干燥法制备植物染色体标本123

【实验二十七】荧光原位杂交和杂交信号检测126

【实验二十八】辣椒花药发育过程中Ca2+分布对热胁迫响应的电镜观察131

【实验二十九】细胞核倍性水平的流式细胞术检测137

【实验三十】7500荧光PCR仪的使用方法142

附录149

附录1光学显微镜的合轴调节149

附录2光学显微镜的物镜分类149

附录3光学显微镜有关术语151

附录4荧光显微镜标本制作及观察要求152

附录5本教程涉及的主要常见试剂配制方法152

附录6离心机的使用要点和注意事项157

附录7722分光光度计的使用要点158

附录8分光光度计基础知识158

附录9离心机转数与离心力的列线图159

附录10硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃）160

附录11细胞化学组织技术介绍160

附录12常见的植物激素配制方法161

附录13原代细胞的培养方法162

附录14农杆菌Ti质粒结构和功能介绍163

附录15流式细胞术所用到的解离液及其配方164

附录16细胞生物学实验技能竞赛试题及参考评分细则166

后记172

无

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前言

学生基本实验技能的培养是循序渐进的过程。一本好的实验教材对实验技能的养成大有裨益。本教材是在《细胞生物学实验讲义》（中南民族大学自编教材）的基础上，经过生物技术和生物工程专业、药学、药剂专业等的5年试用，历经多次修改和完善，交至出版社作为正式教材出版。该实验教材适用于生物类各专业的本科教学以及研究生的基础实验。在教材的试用和完善过程中，中南民族大学细胞生物学教学和科研团队的各位老师对实验教材的起草和完善倾注了心血；在实验讲义使用过程中，王春台、程旺元、龚汉雨、刘虹、李劲等老师为讲义的完善和修改付出了大量的努力；覃瑞、李刚等老师为教材补充了丰富的内容，在此作者深表谢意。

本书的每一个实验，都凝集了编写人员教学实践的经验和心得，只要按照教材的每一步骤认真操作，都能得到满意的实验结果。本教材设计了细胞生物学的基础实验，还开设相当数量的综合实验，可独立于细胞生物学课程理论教学。本教材的编写，体现了如下的教学思想和理念：在注重学生基本实验技能的培养和训练的同时，又注重对学生综合科研能力的培养；在基础实验中，注重实验操作的细节，注重动手能力，注重实验过程的质量监督；在综合性实验中，注重探索以问题解决为核心的细胞生物学的教学实践，注重学生科研训练为导向的科研能力的培养。

“纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行”。本教材的出版，可为本科以及研究生的细胞生物学实验提供规范的操作。在书稿出版之际，非常感谢*第三批高等学校特色专业（中南民族大学生物技术）建设项目（TS11015）和湖北省教育厅生物技术品牌专业建设项目对教材出版的经费支持；非常感谢武汉大学孙蒙祥教授（973首席科学家，中国细胞生物学学会理事，湖北省细胞生物学学会副理事长）在百忙之中为本书出版作序；非常感谢中南民族大学刘学群教授（中国细胞生物学学会会员，湖北省细胞生物学学会理事）为本书的出版提出的宝贵修改建议，并对书稿进行了仔细的审查；感谢武汉大学刘江东博士、湖北大学何玉池博士对实验的部分章节进行了仔细修改和校对；也非常感谢化学工业出版社为本书的顺利出版所做的大量细致工作。后，感谢为书稿完善做出贡献的赵丽、向文豪两位研究生，他们对书稿整理和通稿校对做出了无私奉献。在本书编写和完善过程中，参考了国内外相关的细胞生物学实验教学的内容，对于有参考来源的文献都做了逐一引注；一些内容来源于网络资源，未能查到原始出处的，我们向无名的编写者表示衷心感谢。

受限于作者的知识和经验，教材中的不妥和疏漏之处在所难免，恳请读者提出建议和批评。

2012年9月于中南民族大学南湖畔

书籍介绍

《图解细胞生物学实验教程》包括显微镜的使用，主要细胞器的观察，细胞培养方面的技术和方法及细胞遗传方面的经典实验等方面内容，力求用图解方法将实验过程的每一步骤详细展示，使操作过程可视化，清晰，简洁，便于学生按图索骥。内容涉及30个细胞生物学的基础实验和综合实验，其中，基础性实验能够满足不同的学校教学学时的实际教学需要；提高性的综合性实验可以帮助同学进行创新课题的研究。

《图解细胞生物学实验教程》对实验的设计对本科生乃至研究生的实验操作以及技能培养都有参考意义。